Лабораторный микроскоп нужно выбирать не по самому большому увеличению и не по количеству окуляров. Основной вопрос — какие образцы, каким методом и с какой целью будут исследоваться.
Один прибор может использоваться для рутинного просмотра окрашенных гистологических препаратов. Другой нужен для подсчёта клеток крови, изучения микроорганизмов или анализа осадка мочи. Для живых клеток в культуральных флаконах удобнее инвертированный микроскоп с фазовым контрастом, а для флуоресцентно меченных структур нужна отдельная система освещения, фильтров и соответствующих объективов.
Из-за этого надпись «профессиональный микроскоп 2000×» почти ничего не говорит о реальных возможностях прибора.
Для лаборатории важнее:
- тип конструкции;
- метод наблюдения;
- числовая апертура объективов;
- ровность поля зрения;
- рабочее расстояние;
- качество конденсора;
- настройка освещения;
- механическая точность;
- эргономика;
- совместимость с камерой;
- воспроизведение цвета;
- возможность калибровки;
- доступность сервиса и расходных материалов;
- стабильность результата между операторами.
Короткий вывод:
Для большинства рутинных биологических и клинических задач нужен прямой бинокулярный или тринокулярный микроскоп с планахроматическими объективами 4×, 10×, 40× и, при необходимости, 100× Oil, механическим столиком, точной фокусировкой, конденсором Аббе и регулируемым освещением по принципу Кёлера.
Но такая конфигурация не является универсальной. Для клеточной культуры лучше подходит инвертированный микроскоп. Для металлов — металлографический с отражённым светом. Для живых прозрачных клеток — фазовый контраст. Для специфических молекулярных меток — флуоресценция.
В статье разберём:
- чем лабораторный микроскоп отличается от учебного;
- какие типы профессиональных микроскопов существуют;
- какой прибор нужен для гистологии, гематологии, микробиологии и клеточной культуры;
- что такое светлое поле, тёмное поле, фазовый контраст, поляризация и флуоресценция;
- какие объективы выбрать;
- почему числовая апертура важнее маркетинговой кратности;
- когда нужен объектив 100× с иммерсионным маслом;
- зачем нужны планахроматы;
- как оценить конденсор, диафрагмы, предметный столик и фокусировку;
- какую камеру установить;
- как учесть эргономику, сервис и будущее расширение системы;
- какие ошибки чаще всего допускают при закупке оборудования.
Общие принципы выбора бытовых и учебных моделей рассмотрены в статье «Как выбрать микроскоп?». Для детского использования подготовлен отдельный материал «Как выбрать микроскоп ребёнку», а правила чистки оптики и иммерсионных объективов приведены в инструкции «Как правильно ухаживать за микроскопом».
Короткая таблица выбора
| Задача | Рекомендуемый тип и конфигурация |
|---|---|
| ЗадачаОкрашенные гистологические срезы | Рекомендуемый тип и конфигурацияПрямой светлопольный, 4×/10×/20×/40×, планахроматы |
| ЗадачаЦитологические препараты | Рекомендуемый тип и конфигурацияПрямой бинокулярный или тринокулярный, широкое поле, точная передача цвета |
| ЗадачаМазки крови | Рекомендуемый тип и конфигурацияПрямой светлопольный, 10×/40×/100× Oil |
| ЗадачаМикробиология | Рекомендуемый тип и конфигурацияПрямой, 10×/40×/100× Oil, качественный конденсор |
| ЗадачаОсадок мочи | Рекомендуемый тип и конфигурацияПрямой, 10×/40×, механический столик; по методике возможен фазовый контраст |
| ЗадачаПаразитология | Рекомендуемый тип и конфигурацияПрямой светлопольный, 4×/10×/40× |
| ЗадачаЖивые клетки во флаконах | Рекомендуемый тип и конфигурацияИнвертированный, фазовый контраст, большое рабочее расстояние |
| ЗадачаТканевые культуры | Рекомендуемый тип и конфигурацияИнвертированный с фазовым контрастом, при необходимости флуоресценция |
| ЗадачаФлуоресцентные метки | Рекомендуемый тип и конфигурацияФлуоресцентный с соответствующими LED или источником света и фильтрами |
| ЗадачаКристаллы и анизотропные материалы | Рекомендуемый тип и конфигурацияПоляризационный |
| ЗадачаМеталлы, покрытия, шлифы | Рекомендуемый тип и конфигурацияМеталлографический с отражённым светом |
| ЗадачаКонтроль мелких деталей | Рекомендуемый тип и конфигурацияСтереоскопический или цифровой измерительный |
| ЗадачаФото, отчёты, архивирование | Рекомендуемый тип и конфигурацияТринокулярная головка и лабораторная камера |
| ЗадачаКоличественный анализ | Рекомендуемый тип и конфигурацияКамера, калиброванное программное обеспечение, стабильное освещение |
| ЗадачаБольшой поток рутинных препаратов | Рекомендуемый тип и конфигурацияЭргономичная прямая система с механическим столиком и удобными органами управления |
Что такое лабораторный микроскоп
Лабораторным можно назвать прибор, рассчитанный на регулярную профессиональную работу с воспроизводимым результатом.
Он отличается от простого учебного микроскопа не только ценой или максимальным увеличением.
К важным отличиям относятся:
- стабильное оптическое качество;
- точные механизмы;
- достаточная числовая апертура;
- равномерное освещение;
- широкий диапазон настроек;
- плановая коррекция поля;
- механический координатный столик;
- точная фокусировка;
- эргономичное расположение ручек;
- возможность установить камеру;
- совместимость с дополнительными методами контраста;
- доступность сервисного обслуживания;
- возможность замены объективов и модулей;
- документация и технические характеристики.
В клинической или производственной лаборатории также важно, чтобы система соответствовала внутренним процедурам контроля качества и была пригодна для конкретного диагностического или измерительного процесса.
Не каждый микроскоп с надписью «лабораторный» подходит для постановки медицинского диагноза.
Чем учебный микроскоп отличается от лабораторного
| Характеристика | Учебный | Лабораторный |
|---|---|---|
| ХарактеристикаНагрузка | УчебныйКороткие занятия | ЛабораторныйЕжедневная длительная работа |
| ХарактеристикаОптика | УчебныйБазовые ахроматы | ЛабораторныйПланахроматы, флюориты или апохроматы |
| ХарактеристикаПоле зрения | УчебныйЧасто узкое | ЛабораторныйШирокое и равномерно резкое |
| ХарактеристикаСтолик | УчебныйЗажимы или простая механика | ЛабораторныйТочный координатный механизм |
| ХарактеристикаФокусировка | УчебныйБазовая | ЛабораторныйПлавная коаксиальная грубая и точная |
| ХарактеристикаОсвещение | УчебныйПростой LED | ЛабораторныйРегулируемое освещение с возможностью настройки Кёлера |
| ХарактеристикаКонденсор | УчебныйДиск или простой Аббе | ЛабораторныйЦентрируемый конденсор с диафрагмами |
| ХарактеристикаКамера | УчебныйЧерез окуляр | ЛабораторныйОтдельный тринокулярный порт |
| ХарактеристикаЭргономика | УчебныйВторостепенна | ЛабораторныйКритична для многочасовой работы |
| ХарактеристикаРасширение | УчебныйОграничено | ЛабораторныйФазовый контраст, поляризация, флуоресценция, DIC |
| ХарактеристикаСервис | УчебныйМинимальный | ЛабораторныйЗапчасти, профилактика, ремонт и калибровка |
| ХарактеристикаВоспроизводимость | УчебныйЗависит от оператора | ЛабораторныйНастройки можно стандартизировать |
Типы лабораторных микроскопов
1. Прямой биологический микроскоп
В прямом, или upright, микроскопе объективы расположены над препаратом.
Это основная конструкция для работы со стандартными предметными стёклами.
Она подходит для:
- гистологии;
- цитологии;
- гематологии;
- микробиологии;
- паразитологии;
- анализа осадка мочи;
- ботаники;
- учебных и научных исследований.
Свет обычно проходит снизу через препарат.
Преимущества:
- стандартная работа со стёклами;
- широкий выбор объективов;
- удобство для окрашенных препаратов;
- возможность использовать светлое и тёмное поле;
- фазовый контраст при соответствующей конфигурации;
- флуоресцентные модули;
- поляризационные компоненты;
- доступность бинокулярных и тринокулярных головок.
Это лучшая базовая система для рутинной лаборатории, которая преимущественно исследует тонкие препараты на стекле.
2. Инвертированный микроскоп
В инвертированном микроскопе объективы расположены под образцом, а источник проходящего света — над ним.
Такая конструкция удобна для наблюдения клеток, растущих на дне:
- чашки Петри;
- культурального флакона;
- многолуночного планшета;
- специальной камеры;
- микрофлюидного устройства.
Инвертированная система используется в:
- клеточной культуре;
- эмбриологии;
- репродуктивных технологиях;
- фармакологических исследованиях;
- регенеративной медицине;
- микроманипуляции;
- работе с живыми клетками.
Преимущества:
- не нужно переносить клетки на предметное стекло;
- можно наблюдать культуру без открывания посуды;
- большое расстояние для лабораторной посуды;
- удобно оценивать морфологию и конфлюэнтность клеток;
- можно добавлять фазовый контраст и флуоресценцию.
Недостатки:
- более высокая цена;
- большие габариты;
- более сложная конфигурация;
- не является оптимальной заменой прямого микроскопа для большого количества стандартных гистологических стёкол.
3. Стереоскопический лабораторный микроскоп
Стереомикроскоп имеет два отдельных оптических канала и даёт объёмное восприятие образца.
Его применяют для:
- препарирования;
- сортировки биологических объектов;
- работы с эмбрионами;
- энтомологии;
- ботаники;
- ювелирных изделий;
- электронных компонентов;
- контроля мелких деталей;
- судебной экспертизы;
- производственного контроля.
Основные преимущества:
- большое рабочее расстояние;
- широкое поле зрения;
- значительная глубина резкости;
- простор для инструментов;
- объёмное изображение.
Стереоскопическая система не заменяет биологический микроскоп для клеток и тонких гистологических препаратов.
4. Металлографический микроскоп
Металлы и другие непрозрачные материалы нельзя нормально исследовать с помощью обычного проходящего света.
В металлографическом микроскопе используется отражённое освещение: свет проходит через объектив, отражается от поверхности образца и возвращается в оптическую систему.
Применение:
- структура металлов;
- сварные швы;
- покрытия;
- коррозия;
- дефекты;
- неметаллические включения;
- поверхности полупроводников;
- шлифы;
- контроль качества материалов.
Дополнительно могут использоваться:
- поляризация;
- тёмное поле;
- дифференциально-интерференционный контраст;
- программное измерение;
- автоматический анализ структур.
5. Поляризационный микроскоп
Поляризационная микроскопия используется для анизотропных материалов, которые изменяют состояние поляризованного света.
Она применяется в:
- минералогии;
- геологии;
- петрографии;
- анализе кристаллов;
- полимерной промышленности;
- фармацевтике;
- исследовании волокон;
- отдельных клинических анализах кристаллов.
Полноценный поляризационный микроскоп может иметь:
- поляризатор;
- анализатор;
- вращающийся градуированный столик;
- компенсаторы;
- центрируемые объективы;
- оптику с низким внутренним напряжением.
Добавление двух простых поляризационных фильтров к биологическому микроскопу может быть достаточным для демонстраций, но не всегда заменяет профессиональную измерительную систему.
6. Флуоресцентный микроскоп
Флуоресцентная микроскопия использует флуорофоры, которые поглощают свет одного диапазона и излучают свет другого.
Система включает:
- источник возбуждения;
- фильтр возбуждения;
- дихроичное зеркало;
- эмиссионный фильтр;
- соответствующие объективы;
- защиту оператора;
- часто чувствительную камеру.
Флуоресценцию применяют в:
- иммунологии;
- гистопатологии;
- цитогенетике;
- микробиологии;
- молекулярной биологии;
- клеточной биологии;
- онкологических исследованиях;
- FISH;
- визуализации белков и органелл.
Важно покупать не просто «микроскоп с синей лампой», а систему, фильтры и камеру, согласованные с конкретными флуорофорами.
7. Электронный микроскоп
Электронная микроскопия обеспечивает значительно более высокое разрешение, чем световая, но относится к совершенно другому классу оборудования.
Она требует:
- вакуумной системы;
- специальной подготовки образца;
- сложного источника электронов;
- отдельного помещения;
- контроля вибраций;
- подготовленного персонала;
- специализированного сервиса.
Электронная микроскопия не является стандартной заменой светового микроскопа для рутинного просмотра окрашенных мазков и гистологических препаратов.
При этом неправильно утверждать, что она вообще не используется в диагностике. Трансмиссионная электронная микроскопия может применяться в специализированных случаях, в частности в нефропатологии, исследовании ультраструктуры клеток и уточнении отдельных диагнозов.
Прямой или инвертированный микроскоп
| Критерий | Прямой | Инвертированный |
|---|---|---|
| КритерийПоложение объективов | ПрямойНад препаратом | ИнвертированныйПод препаратом |
| КритерийОсновной образец | ПрямойПредметное стекло | ИнвертированныйЧашка, флакон, планшет |
| КритерийГистологические срезы | ПрямойОптимально | ИнвертированныйНеудобно |
| КритерийМазки крови | ПрямойОптимально | ИнвертированныйНе основное применение |
| КритерийЖивые клетки в культуре | ПрямойВозможно с ограничениями | ИнвертированныйОптимально |
| КритерийКрупная лабораторная посуда | ПрямойОграниченно | ИнвертированныйУдобно |
| КритерийФазовый контраст | ПрямойВозможен | ИнвертированныйОчень распространён |
| КритерийМикроманипуляция | ПрямойОграничена | ИнвертированныйУдобна |
| КритерийРутинная клиническая лаборатория | ПрямойЧасто основной вариант | ИнвертированныйДля специальных подразделений |
Методы наблюдения
Тип микроскопа нужно выбирать вместе с методом формирования контраста.
Светлое поле
Светлое поле — самый распространённый метод. Образец выглядит более тёмным или цветным на светлом фоне.
Подходит для:
- окрашенных гистологических срезов;
- цитологических мазков;
- препаратов крови;
- окрашенных бактерий;
- паразитологических препаратов;
- растительных срезов.
Для прозрачных неокрашенных живых клеток светлое поле может давать недостаточный контраст.
Фазовый контраст
Фазовый контраст преобразует небольшие различия показателя преломления и толщины прозрачного образца в видимые изменения яркости.
Он особенно полезен для:
- живых неокрашенных клеток;
- клеточных культур;
- простейших;
- микроорганизмов;
- тонких прозрачных структур;
- оценки морфологии без окрашивания.
Для фазового контраста нужны:
- фазовые объективы;
- соответствующие кольцевые диафрагмы в конденсоре;
- правильное центрирование;
- телескоп или другой способ совмещения колец.
Обычный ахроматический объектив не становится фазовым только после установки специального конденсора.
Тёмное поле
В тёмном поле прямой свет не попадает в объектив. На тёмном фоне видно свет, рассеянный образцом.
Метод полезен для:
- тонких слабоконтрастных объектов;
- мелких частиц;
- некоторых микроорганизмов;
- волокон;
- краёв и дефектов поверхности.
Для больших числовых апертур может потребоваться специальный тёмнопольный конденсор и иммерсионная система.
Дифференциально-интерференционный контраст
DIC усиливает небольшие различия оптической толщины и создаёт характерное рельефоподобное изображение.
Он используется для:
- живых клеток;
- тканевых культур;
- прозрачных организмов;
- микроструктур;
- высококачественной цифровой документации.
Система сложнее и дороже фазового контраста. Она требует согласованных призм, поляризаторов и объективов.
Поляризация
Поляризационный метод нужен для материалов с двойным лучепреломлением.
Перед покупкой определите, достаточно ли простого набора поляризатор-анализатор, или нужны:
- компенсаторы;
- коноскопическое наблюдение;
- центрируемый вращающийся столик;
- специальные объективы;
- измерение углов.
Флуоресценция
Для флуоресцентной работы определите:
- какие флуорофоры будут использоваться;
- их спектры возбуждения и эмиссии;
- количество каналов;
- необходимую чувствительность;
- допустимую фототоксичность;
- скорость съёмки;
- потребность в монохромной или цветной камере;
- необходимость защиты от внешнего света;
- возможность будущего расширения.
Какая конфигурация нужна разным лабораториям
| Сфера | Базовая конфигурация |
|---|---|
| СфераГистология | Базовая конфигурацияПрямой тринокулярный, планахроматы 4×/10×/20×/40×, точное воспроизведение цвета |
| СфераЦитология | Базовая конфигурацияПрямой, широкое поле, удобная эргономика, 10×/20×/40× |
| СфераГематология | Базовая конфигурацияПрямой, 10×/40×/100× Oil, качественный конденсор |
| СфераБактериология | Базовая конфигурацияПрямой, 10×/40×/100× Oil, светлое поле; по методике тёмное поле |
| СфераОсадок мочи | Базовая конфигурацияПрямой, 10×/40×, точный столик, возможен фазовый контраст |
| СфераПаразитология | Базовая конфигурацияПрямой, 4×/10×/40×, широкое поле |
| СфераКлеточная культура | Базовая конфигурацияИнвертированный, 4×/10×/20×/40×, фазовый контраст |
| СфераИммунная флуоресценция | Базовая конфигурацияПрямой или инвертированный флуоресцентный, соответствующие фильтры |
| СфераМинералогия | Базовая конфигурацияПоляризационный с вращающимся столиком |
| СфераМеталлография | Базовая конфигурацияОтражённый свет, плановые объективы, поляризация или DIC при необходимости |
| СфераКонтроль производства | Базовая конфигурацияСтерео, металлографический или цифровой измерительный |
| СфераНаучная визуализация | Базовая конфигурацияМодульная тринокулярная система с камерой и методами контраста |
Увеличение лабораторного микроскопа
Общее оптическое увеличение равно увеличению объектива, умноженному на увеличение окуляра.
Общее увеличение = объектив × окуляр
Для окуляра 10×:
| Объектив | Общее увеличение |
|---|---|
| Объектив4× | Общее увеличение40× |
| Объектив10× | Общее увеличение100× |
| Объектив20× | Общее увеличение200× |
| Объектив40× | Общее увеличение400× |
| Объектив60× | Общее увеличение600× |
| Объектив100× | Общее увеличение1000× |
Заявленные 1200×, 1600× или 2000× часто получают установкой сильного окуляра, но это не гарантирует появления новых деталей.
Полезное и пустое увеличение
Максимальное полезное увеличение зависит от числовой апертуры объектива.
Ориентировочный диапазон:
- нижняя граница — около 500 × NA;
- верхняя граница — около 1000 × NA.
Например, объектив 40× с NA 0,65 имеет приблизительный полезный диапазон от 325× до 650×.
С окуляром 10× он даёт 400× — нормальное полезное увеличение.
С окуляром 20× он даст 800×, но это уже превышает ориентировочную верхнюю границу. Картинка станет больше, однако новые структуры могут не появиться.
Поэтому качественный микроскоп 1000× может быть значительно лучше слабой модели 2000×.
Числовая апертура
Числовая апертура, или NA, характеризует способность объектива:
- собирать свет;
- различать близкие детали;
- формировать яркое изображение;
- работать с определённым методом контраста.
При одинаковом увеличении объектив с более высокой NA обычно даёт лучшее разрешение.
Пример типичных значений:
| Объектив | Ориентировочная NA |
|---|---|
| Объектив4× | Ориентировочная NA0,10 |
| Объектив10× | Ориентировочная NA0,25 |
| Объектив20× | Ориентировочная NA0,40–0,50 |
| Объектив40× dry | Ориентировочная NA0,60–0,75 |
| Объектив60× dry | Ориентировочная NA0,80–0,95 |
| Объектив100× Oil | Ориентировочная NA1,25–1,40 |
Конкретные параметры зависят от класса и конструкции объектива.
Не сравнивайте объективы только по надписи 40×. Один может иметь NA 0,60, другой — 0,75, а третий быть специально рассчитанным для флуоресценции или фазового контраста.
Разрешение
Разрешение показывает, насколько близко могут располагаться две точки, чтобы система отобразила их отдельно.
Оно зависит от:
- числовой апертуры объектива;
- числовой апертуры конденсора;
- длины волны света;
- правильного освещения;
- качества препарата;
- покровного стекла;
- иммерсионной среды;
- оптических аберраций;
- настройки системы.
Именно разрешение, а не большая цифра увеличения определяет, сколько реальной информации видно.
Какие объективы нужны лаборатории
Объектив 4×
Используется для:
- быстрого осмотра;
- поиска препарата;
- больших гистологических срезов;
- ориентации;
- фотографирования больших участков.
Для больших предметных стёкол может быть важно широкое поле и совместимый конденсор.
Объектив 10×
Основной обзорный объектив для:
- гистологии;
- цитологии;
- осадка мочи;
- паразитологии;
- клеточной культуры;
- микробиологической ориентации.
Объектив 20×
Удобный промежуточный вариант для:
- гистологии;
- цитологии;
- клеточной морфологии;
- цифровой документации.
Он позволяет получить больше деталей, не сужая поле так сильно, как 40×.
Объектив 40×
Используется для:
- клеточной детализации;
- цитологических препаратов;
- осадка мочи;
- микроорганизмов;
- тонких структур тканей;
- подсчёта и классификации элементов.
Большинство 40× являются сухими объективами. Не допускайте попадания на них иммерсионного масла.
Объектив 100× Oil
Применяется для:
- окрашенных бактериальных препаратов;
- детального просмотра мазков крови;
- отдельных цитологических и микробиологических задач;
- мелких структур, требующих высокой NA.
Его не нужно автоматически считать обязательным для каждой лаборатории.
Например, при рутинном просмотре гистологических срезов основной объём работы часто выполняется на 4×, 10×, 20× и 40×. Потребность в иммерсионном объективе зависит от методики.
Как распознать иммерсионный объектив
Надёжнее всего ориентироваться на маркировку:
- Oil;
- Oel;
- HI;
- Water или W;
- Gly;
- Silicone;
- другую указанную жидкость.
Цветные кольца могут обозначать как увеличение, так и тип иммерсионной среды. Например, белая полоса часто используется для обозначения увеличения 100×, а отдельная узкая чёрная полоса может указывать на масляную иммерсию.
Поэтому фраза «иммерсионный объектив всегда обозначен чёрным ободком» недостаточно точна.
Читайте полную гравировку на корпусе и документацию производителя.
Сухие, масляные, водные и силиконовые объективы
| Тип | Среда между объективом и образцом | Типичные задачи |
|---|---|---|
| ТипDry | Среда между объективом и образцомВоздух | Типичные задачиРутинная работа 4×–40× |
| ТипOil | Среда между объективом и образцомИммерсионное масло | Типичные задачиВысокая NA, бактерии, мазки |
| ТипWater | Среда между объективом и образцомВода | Типичные задачиЖивые водные образцы, толстые препараты |
| ТипGlycerol | Среда между объективом и образцомГлицерин | Типичные задачиСпециализированная визуализация |
| ТипSilicone oil | Среда между объективом и образцомСиликоновое масло | Типичные задачиДлительная работа с живыми и толстыми образцами |
Не используйте случайную среду. Объектив оптимизирован под конкретный показатель преломления.
Ахроматы, планахроматы и апохроматы
Ахроматические объективы
Ахроматы корректируют основные хроматические и сферические аберрации, но поле может быть резким преимущественно в центральной части.
Подходят для:
- обучения;
- базовых рутинных исследований;
- лаборатории с ограниченным бюджетом;
- визуального наблюдения без сложной документации.
Планахроматические объективы
Планахроматы лучше корректируют кривизну поля.
Их преимущества:
- резкость ближе к краям;
- удобство просмотра широкого поля;
- лучшая цифровая документация;
- меньше потребности перефокусировать край кадра;
- удобство для цитологии и гистологии.
Для современной профессиональной лаборатории планахроматы часто являются наиболее практичным базовым выбором.
Флюоритовые объективы
Plan Fluor или Plan Fluorite обеспечивают:
- лучшую коррекцию аберраций;
- более высокую NA;
- хорошую светопропускную способность;
- лучшую работу во флуоресценции;
- качественную цифровую съёмку.
Они дороже обычных планахроматов.
Апохроматические объективы
Апохроматы имеют самый высокий уровень коррекции цветовых и геометрических аберраций.
Их выбирают для:
- высококачественной флуоресценции;
- количественной визуализации;
- конфокальной микроскопии;
- научной публикационной съёмки;
- многоканальных исследований;
- высокого разрешения.
Для обычной рутинной лаборатории их стоимость может быть неоправданной.
| Класс | Рутинный осмотр | Фото | Флуоресценция | Стоимость |
|---|---|---|---|---|
| КлассАхромат | Рутинный осмотрХорошо в центре | ФотоБазово | ФлуоресценцияОграниченно | СтоимостьНизкая |
| КлассPlan Achromat | Рутинный осмотрОчень хорошо | ФотоХорошо | ФлуоресценцияЗависит от модели | СтоимостьСредняя |
| КлассPlan Fluor | Рутинный осмотрОтлично | ФотоОчень хорошо | ФлуоресценцияХорошо | СтоимостьВысокая |
| КлассPlan Apochromat | Рутинный осмотрОтлично | ФотоОтлично | ФлуоресценцияОтлично | СтоимостьОчень высокая |
Покровное стекло 0,17 мм
Многие биологические объективы среднего и высокого увеличения рассчитаны на покровное стекло толщиной примерно 0,17 мм.
На корпусе может быть маркировка:
- 0.17;
- 0;
- тире;
- диапазон толщин;
- коррекционное кольцо.
Неправильная толщина покровного стекла может снижать качество изображения, особенно при высокой числовой апертуре.
Для лабораторного процесса важно стандартизировать:
- тип стекла;
- толщину;
- монтажную среду;
- положение препарата;
- совместимость с объективом.
Коррекционное кольцо
Некоторые объективы имеют кольцо для компенсации:
- разной толщины покровного стекла;
- толщины дна культуральной посуды;
- температуры;
- показателя преломления среды.
Такой объектив полезен в сложной работе с живыми клетками, но требует правильной настройки.
Рабочее расстояние
Рабочее расстояние — промежуток между передней линзой объектива и образцом в фокусе.
С увеличением кратности и NA оно обычно уменьшается.
Большое рабочее расстояние нужно для:
- культуральной посуды;
- толстых образцов;
- микроманипуляторов;
- препарирования;
- промышленного контроля;
- работы через защитное стекло.
Для стандартного тонкого препарата короткое рабочее расстояние может быть нормальным.
Конечная или бесконечно скорректированная система
Более старые и часть базовых систем используют конечную длину тубуса, например 160 мм.
Современные профессиональные микроскопы часто имеют бесконечно скорректированную оптику, обозначенную знаком ∞.
В такой системе между объективом и тубусной линзой можно располагать:
- фильтры;
- делители света;
- флуоресцентные модули;
- поляризационные компоненты;
- камеры;
- другие оптические устройства.
